生物法制備環(huán)磷腺苷及其應(yīng)用

 　　一、成果簡介

　　本研究成果提供了一種全細(xì)胞催化制備環(huán)磷腺苷(cAMP)的方法，從cAMP生產(chǎn)菌株中克隆得到的腺苷酸環(huán)化酶基因，利用基因重組大腸桿菌實現(xiàn)在細(xì)胞水平催化生產(chǎn)cAMP，以三磷酸腺苷為原料，在鎂離子、丙酮酸等物質(zhì)條件下，加入表面活性劑增加細(xì)胞膜的通透性，利用重組大腸桿菌泥將三磷酸腺苷催化轉(zhuǎn)化為cAMP，重組菌在全細(xì)胞催化過程中表現(xiàn)出良好的催化活性和穩(wěn)定性，對底物三磷酸腺苷的轉(zhuǎn)化率達(dá)到90%以上，反應(yīng)體系簡單、條件溫和、周期短、副產(chǎn)物少。催化液再經(jīng)陶瓷膜過濾除雜、超濾膜過濾除蛋白質(zhì)及脫色、納濾膜脫鹽及濃縮、結(jié)晶和真空干燥，最終得到白色結(jié)晶性粉末樣的高純度cAMP成品。

　　二、技術(shù)優(yōu)勢

　　該生產(chǎn)工藝操作簡便、安全，轉(zhuǎn)化率高，催化過程易于控制，反應(yīng)體系中產(chǎn)物專一，不含有毒的原料試劑等雜質(zhì)，非常有利于后續(xù)的分離純化，而且大腸桿菌培養(yǎng)條件簡單、周期短，可大大降低培養(yǎng)成本，是一條簡單、快速、高效的生產(chǎn)途徑，合適于工業(yè)化大生產(chǎn)。分離工藝采用膜分離和等電點結(jié)晶相結(jié)合的技術(shù)，具有流程短，收率高，且產(chǎn)品的色澤好、純度高。由于避免使用離子交換色譜技術(shù)，極大地降低了酸、堿的用量及廢水排放量少，環(huán)境友好，并且降低了整個生產(chǎn)成本。

　　三、推廣應(yīng)用

　　cAMP是有機(jī)體中廣泛存在的一種具有生理活性的重要物質(zhì)，在細(xì)胞內(nèi)起到調(diào)節(jié)生理活動的重要作用，如細(xì)胞增殖與分化、激素的合成與分泌、膜蛋白活性、神經(jīng)活動和基因表達(dá)等。cAMP在疾病治療和肉畜食品方面中起著非常重要的作用。

　　四、合作方式

　　技術(shù)合作、技術(shù)轉(zhuǎn)讓。